ЭКСТРАКЦИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ КЛАВИНОВЫХ АДКАЛОИДОВ И АЛКАЛОИДОВ ЛИЗЕРГИНОВОЙ КИСЛОТЫ В СЕМЕНАХ РАСТЕНИЯ "УТРЕННЯЯ СЛАВА" (Ipomoea violacea)

WELDON L. WITTERS

Департамент Зоологии и Микробиологии , Университет Огайо 

Цитируется по "Ohio J. Sci." 75(4), стр. 198, 1975г. Перевод: siouxsie at entheogen.ru (оригинал: доступен здесь)

ВВЕДЕНИЕ:

Семена трех разновидностей ипомеи, выращенной в штате Огайо были протестированы на наличие клавиновых алкалоидов и алкалоидов лизергиновой кислоты. Сравнивались три различных способа экстракции эрголиновых алкалоидов , и было показано значительное приемущество метода со смесью нашатырного спирта, метанола и хлороформа. Сравнивались четыре хроматографические системы на предмет нахождения лучшей для идентификации алкалоидов, и было показано, что TLC c со смесью этилацетата, этанола и диметилформамида (диметлиламида муравьиной кислоты) дает наилучшее разрешение для эрголиновых алкалоидов. Ipomoea violacea L. var Pearly Gates в тесте показала значительно большее содержание алкалоидов и большее количество уникальных эрголиновых алкалоидов.

Уже сравнительно давно ученым было известно о целом ряде галлюциногенных адкалоидов в таких, не имеющих ничего общего между смобой представителях флоры , как кактусы, грибы и вьюнки. Существуют свидетельства об использовании этих растений некоторыми группами индейцев для церемониальных целей (MacDougall, 1960; Schultes, 1941), хотя нет таких данных об индейцах проживающих в штате Огайо. MacDougall считал , что некоторые индейские племена использовали вьюнковые в религиозных церемониях и как своего рода наркотик и анальгетик. В начале 1570-х, личный врач-терапевт короля испании, Эрнандез (Hernandez), писал что Ацтеки использовали семена вьюнковых, которые они называли Ололиуки (Ololiuqui) для связи со своими богами (Hoffman, 1968).

В 1930-х годах Швейцарская фармацевтическая компания Сандоз (Sandoz) выделела несколько фармакологически активных веществ из гриба-паразита - спорыньи (Claviceps purpurea). Эти вещества оказались производными лизергиновой кислоты и клавиновыми алкалоидами. Эти соединения иногда еще называют эрголиновыми соединениями (Der Marderosian, 1965). В 1938, Альберт Хоффман, работающий в то время в Сандоз синтезировал LSD из эрголиновых алкалоидов , а в 1960-м он обнаружил наличие производных лизергиновой кислоты и клавиновых в семенах растения Ipomoea violacea Sp. (Hoffman , 1968)

Несколько исследований с тех пор подтвердили наличие эрголиновых алкалоидов в различных видах Ipomoea (Genest, 1966; Niwaguchi and Inoue, 1969; Taber et al., 1963). В литературе имеется много данных о количественном и качественном анализе вьюнковых на эрголиновые соединения. Все эти данные в значительной степени зависили от используемой техники экстракции и идентификации. Наши лабораторные исследования показали что содержание алкалоидов варьирует от урожая к урожаю , и в то же время техника экстракции и используемый метод анализа имеют первостепенное значение.

МЕТОДИКА:

Семена были собраны с трех различных подвидов ипомеи: Ipomoea violacea L var. Heavenly Blue , Ipomoea violacea L var. Pearly Gates и Ipomoea violacea L var. Blue Star. (по классификации предложенной Der Marterosian 1967). астения были выращены из семян купленных у George W. Park Seed Co., Greenwood, North Carolina.

Сравнивались три метода экстракции эрголиновых алкалоидов, в каждом из готорых экстракция производилась из 5 граммов семян (для каждого вида - отдельно). Семена были помолоты с использованием чистого кварцевого песка. Содержание эрголиновых алкалоидов было проанализировано цветометрическими методами , разработанными (Genest 1966, Vinning and Taber 1959).

Были использованы следующие методы экстракции:

1. Помолотые семена промывались 50 мл. смеси 10% бикарбоната натрия (соды) и этилацетата (смесь готовилась из расчета 1:1). растворитель затем отделялся от жмыха и высушивался. Получившийся после высушивания растворителя осадок осадок обрабатывался 50 мл. смеси (1:1) диэтилового эфира и 1% винной кислоты. Алкалоиды присутствовали в нижнем слое (Tabert et al., 1963).

2. Помолотые семена были залиты 10% нашатырным спиртом в диэтиловом эфире. астворитель затем фильтровался, упаривался и осадок обрабатывался смесью диэтилового эфира и винной кислоты , так же как и в методе (1).

3. Помолотые семена обрабатывались смесью (10:90:900) нашатырного спирта, метанола и хлороформа. После постоянного перетряхивания смеси в течении 5 минут было добавлено 50 мл. хлороформа и 2 мл. воды. Смесь была отфлильтрована через стекловолокно (Alexander and Banes , 1961).

Полученный раствор в каждом из описанных выше методов обрабатывался хлороформом, после нейтрализации раствора избытком содой. Хлороформ затем отгонялся под вакуумом и осадок растворяли в этаноле.

Изоляция и идентификация эрголиновых алкалоидов выполнялась четырмя различными хроматографическими методами. (описание методов TLC пропущено и может быть найдено в оригинале статьи здесь, прим. перев.)

ЕЗУЛЬТАТЫ:

Из трех проанализированных видов, Ipomoea violacea L var. Pearly Gates показала значительно более высокое содержание алкалоидов во всех трех методах экстракции описанных выше (Табл. 1). азновидность Pearly Gates дала в конечном счете 0,060% в среднем в пересчете на вес свежих семян , в то время как для Heavenly Blue (известная в оссии как "Небесно Голубая" прим. перев.) и Blue Star это значение было 0,034 и 0,027% соответственно. Способ экстракции с использованием нашатырного спирта, метанола и хлороформа, разработанный Alexander и Banes в (1961) дал наилучший выход в пересчете на вес свежих семян при экстрагировании из трех вышеописанных видов.

Таблица 1.

*) Значения представлены в эквиваленте эргометрина, с использованием реагента Ван Урка (см. Vining and Taber, 1959)

**) Номера методов экстракций соответствуют номерам методов данных выше по тексту

Усредненный вес экстрагированных алкалоидов относительно массы семян полученный в методе с использованием нашатырного спирта, метанола и хлороформа дал выход 0.045 , в то время как раствор нашатырного спирта в диэтиловом эфире дал 0.043 а смесь соды и этилацетата - всего 0.030 процентов.

азновидность Pearly Gates показала в тесте наибольшее содержание эрголиновых алкалоидов при использовании всех трех методов экстракции.

Не менее интересен и результат хроматографии для этих трех видов семян: